Spider-Man 3 antaa pelaajan kokea klassisen punasinipukuisen sankarin lisäksi, myös synkän ja mystisen mustapukuisen persoonan. Tällä kertaa New York on entistä laajempi, yksityiskohtaisempi ja vapaampi alue tutkittavaksi. Koe kolmannen Spider-Man-elokuvan tapahtumien lisäksi uutta tarinaa sisältäviä tehtäviä, uusia liikkeitä ja taitoja ja taistele kymmentä pahamaineisempaa vihollista vastaan eeppisissä pomotappeluissa, mukana mm. Venom!